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生物大分子的液相色谱分离和制备

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  • 作 者:师治贤,王俊德编着
  • 出 版 社:北京市:科学出版社
  • 出版年份:1992
  • ISBN:7030030419
  • 页数:220 页

图书介绍: 查看图书目录点击购买PDF全本电子书 上一篇:医院管理学下一篇:中华食物疗法大全 《生物大分子的液相色谱分离和制备》目录 标签:大分子 液相 色谱 制备 编着

第一章 绪论1

目录1

1.1 生物大分子液相色谱分离和制备的发展方向2

1.2 分离介质的发展3

1.3 分离模式的考虑5

1.3.1 体积排阻色谱5

1.3.2 离子交换色谱6

1.3.3 反相色谱7

1.3.4 疏水作用色谱7

1.4 分离规模的扩大8

1.3.5 亲合色谱8

第二章 高效液相制备色谱的分离设计12

2.1 制备色谱分离的一般考虑13

2.1.1 制备色谱运行的模式14

2.1.2 切割收集技术14

2.1.3 微量组分的制备16

2.1.4 实验条件的一般选择17

2.2 制备色谱模型的讨论18

2.3 实验条件的选择与产量20

2.3.1 柱体积与填料20

2.3.2 流动相的选择24

2.3.3 样品的溶解度26

2.3.4 样品量28

2.3.5 样品纯度的确定29

2.3.6 最佳制备量29

2.4 制备色谱仪31

2.4.1 泵系统32

2.4.2 检测系统32

2.4.3 进样系统33

2.4.4 样品的收集34

3.1.1 在分析柱上的制备35

3.1.2 小规模的制备35

3.1 制备规模35

第三章 制备柱及相关技术35

3.1.3 大规模的制备36

3.2 制备柱的装填技术36

3.3 径向流动色谱38

3.3.1 径向流动色谱设计的原理39

3.3.2 径向流动和轴向流动的比较39

3.4 柱容量及其影响因素40

3.5 制备所得生物大分子纯度的评价44

4.1 顶替色谱的原理46

第四章 顶替色谱46

4.2.1 操作线47

4.2 顶替色谱的特性47

4.2.2 溶质的流速48

4.2.3 总效率49

4.3 顶替色谱实验条件51

4.3.1 顶替剂及其选择51

4.3.2 流动相的选择及影响52

4.3.3 填料及其影响53

4.3.4 柱直径及其影响54

4.4.1 实验设计55

4.4 溶质-溶质顶替色谱55

4.4.2 操作参数56

4.4.3 多次顶替59

第五章 体积排阻色谱61

5.1 体积排阻色谱理论61

5.1.1 保留模型61

5.1.2 保留机理62

5.2 体积排阻色谱理论模型64

5.2.1 硬球体溶质模型64

5.2.4 任意弯曲溶质模型65

5.2.3 任意平面孔模型-刚性溶质65

5.2.2 刚性分子溶质模型65

5.3 体积排阻色谱填料66

5.3.1 有机填料66

5.3.2 无机填料66

5.3.3 适合生物大分子分离的填料68

5.4 体积排阻色谱参数的讨论68

5.4.1 峰容量68

5.4.2 聚合物在体积排阻色谱上的分离69

5.4.3 分子量的准确测定70

5.5 体积排阻色谱操作条件71

5.5.1 填料72

5.5.2 柱长72

5.5.3 洗脱液72

5.5.4 流速73

5.5.5 样品容量74

5.5.6 蛋白质在变性洗脱条件下的分离74

5.6 蛋白质在体积排阻色谱上的保留行为75

5.6.1 蛋白质的分离76

5.6.2 蛋白质的分子量与容量因子(k′)76

5.6.4 pH不同时的分配系数与离子强度77

5.6.3 分配系数(Kd)77

5.6.5 在一定pH条件下蛋白质的分离度和离子强度78

5.6.6 离子强度恒定时pH对分配系数的影响79

第六章 离子交换色谱82

6.1 填料82

6.1.1 有机树脂填料83

6.1.2 无机-有机复合填料84

6.1.3 表面改性的无机填料及合成方法84

6.2 参数讨论87

6.2.1 孔径的影响87

6.2.2 柱长的影响88

6.2.3 流速的影响89

6.2.4 pH的影响89

6.2.5 离子强度的影响93

6.3 保留模型94

6.4 离子交换色谱分离和纯化蛋白质96

6.4.1 大豆中混合蛋白质的分离和纯化97

6.4.2 细胞色素C553的分离和纯化99

6.4.3 β-半乳糖苷酶和磷酸酶的分离和纯化99

6.4.4 牛血清蛋白(OVA)和大豆蛋白(STI)混合物的纯化102

7.1 溶质保留机理104

第七章 反相液相色谱104

7.2 填料及一般合成方法106

7.2.1 填料概述106

7.2.2 填料合成的一般方法108

7.3 分离和制备色谱的选择110

7.3.1 柱容量与分离度110

7.3.2 色谱柱的柱效率与蛋白质的分离度112

7.3.3 流动相的选择112

7.3.4 柱温的影响113

7.3.5 流速的影响116

7.4.1 上柱量与回收率的关系117

7.4 蛋白质在柱上的回收率117

7.4.2 洗脱系统与回收率的关系119

第八章 高效疏水作用色谱121

8.1 高效疏水作用色谱的原理121

8.2 高效疏水作用色谱填料123

8.2.1 基质124

10.1.3 甲醇含量的变化对容量因子k′的影响175

10.1.4 核苷和核苷酸分离175

10.2 单克隆抗体的分离和纯化181

10.2.1 分析分离系统182

10.2.2 分离纯化系统184

10.2.3 腹水和组织培养中单克隆抗体的分离和纯化186

10.3 人体血清中脱脂蛋白质的分离和纯化187

10.3.1 样品的制备188

10.3.2 色谱分离纯化系统188

10.4 α-淀粉酶的分离和纯化190

10.4.1 样品的制备190

10.4.2 酶活性测定190

10.4.3 分离纯化190

10.5 大豆蛋白在反相色谱上的分离和纯化191

10.4.4 酶活性与酶进样的关系191

10.5.1 混合蛋白的提取192

10.5.2 实验方法的设计192

10.5.3 实验条件192

10.5.4 细胞色素C的纯化193

10.5.5 大豆蛋白有效成分的分离和纯化193

第十一章 生物样品的制备196

11.1 材料选择及预处理196

11.2 细胞的破碎197

11.2.1 物理法197

11.3 提取198

11.2.3 化学处理法198

11.2.2 生物化学法198

11.3.1 蛋白质和酶的提取199

11.3.2 核酸的提取201

11.4 蛋白质和酶的初步提纯202

11.4.1 核酸沉淀法203

11.4.2 蛋白质沉淀法203

11.4.3 改变pH值203

11.4.4 选择变性法203

11.4.5 盐析法203

11.5 核酸的水解204

附录 国外常用的适于生物大分子分离分析的206

高效液相色谱填料206

表1 高效体积排阻色谱(SEC)填料206

表2 反相色谱(RPC)填料(大孔)208

表3 疏水作用色谱(HIC)填料211

表4 离子交换色谱(IEC)填料212

表5 亲合色谱(AFC)填料216

1.亲合色谱常用的底物(基体)216

2.一些代表性的亲合色谱填料举例217

索引218

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摘要:本文详细介绍了生物大分子的液相色谱分离和制备技术,通过分析《生物大分子的液相色谱分离和制备.pdf电子书版文档下载》的内容,从原理、方法、应用和前景四个方面进行了深入探讨,旨在为相关领域的研究者和从业者提供有益的参考。

1、原理

液相色谱分离技术是一种基于分子大小、形状、电荷等物理化学性质的分离方法。在生物大分子的液相色谱分离中,常用的原理包括分子筛效应、吸附作用和离子交换等。这些原理使得液相色谱技术在生物大分子的分离和制备中具有广泛的应用前景。

《生物大分子的液相色谱分离和制备.pdf电子书版文档下载》详细介绍了液相色谱分离的原理,包括色谱柱的选择、流动相的配置、检测方法等。这些内容为读者提供了深入了解液相色谱分离技术的理论基础。

此外,书中还介绍了液相色谱分离技术在生物大分子制备中的应用,如蛋白质、核酸、多糖等生物大分子的分离纯化。这些应用案例为读者提供了实际操作的经验和技巧。

2、方法

液相色谱分离方法主要包括高效液相色谱(HPLC)、凝胶渗透色谱(GPC)、亲和色谱、离子交换色谱等。这些方法各有特点,适用于不同类型的生物大分子分离。

《生物大分子的液相色谱分离和制备.pdf电子书版文档下载》详细介绍了这些液相色谱分离方法的基本原理、操作步骤和注意事项。例如,HPLC技术在生物大分子分离中的应用,包括流动相的选择、柱温的控制、检测器的选择等。

书中还介绍了液相色谱分离方法在生物大分子制备中的应用实例,如蛋白质的纯化、核酸的分离等。这些实例为读者提供了实际操作的参考。

3、应用

液相色谱分离技术在生物大分子研究领域具有广泛的应用,如蛋白质组学、代谢组学、药物研发等。《生物大分子的液相色谱分离和制备.pdf电子书版文档下载》详细介绍了液相色谱分离技术在这些领域的应用案例。

例如,在蛋白质组学研究中,液相色谱分离技术可以用于蛋白质的分离、鉴定和定量。在代谢组学研究中,液相色谱分离技术可以用于代谢产物的分离和鉴定。在药物研发中,液相色谱分离技术可以用于药物成分的分离和纯化。

此外,书中还介绍了液相色谱分离技术在生物大分子制备中的应用,如蛋白质的纯化、核酸的分离等。这些应用案例为读者提供了实际操作的参考。

4、前景

随着生物技术的不断发展,液相色谱分离技术在生物大分子研究领域具有广阔的应用前景。未来,液相色谱分离技术将在以下几个方面取得突破:

1)提高分离效率,降低分析时间;

2)提高检测灵敏度,实现微量分析;

3)开发新型色谱柱和检测器,拓展应用领域。

《生物大分子的液相色谱分离和制备.pdf电子书版文档下载》对液相色谱分离技术的发展趋势进行了展望,为相关领域的研究者和从业者提供了有益的参考。

总结:

本文通过对《生物大分子的液相色谱分离和制备.pdf电子书版文档下载》的分析,详细介绍了液相色谱分离技术在生物大分子研究领域的重要性、应用方法和前景。液相色谱分离技术在生物大分子分离和制备中具有广泛的应用前景,为相关领域的研究者和从业者提供了有益的参考。

液相色谱分离技术在生物大分子研究领域具有广泛的应用前景,随着技术的不断发展,液相色谱分离技术将在生物大分子分离和制备中发挥越来越重要的作用。

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